Пренатальная диагностика генных болезней

Общие замечания:

• На долю генных нарушений приходится в общей сложности до 5% всей врожденной патологии.
• Более половины случаев моногенной патологии, требующей пренатальной диагностики, составляют такие сравнительно частые и тяжелые болезни, как муковисцидоз, миодистрофия Дюшена, синдром ломкой X-хромосомы, гемофилия А, фенилкетонурия, поликистоз легких, атаксия Фридрейха, синдром Верднига-Гоффмана и  синдром Шарко-Мари-Тус.

Молекулярная (ДНК) диагностика проводится на уровне отдельных генов, и даже на уровне фрагментов ДНК самих генов или близлежащих ДНК-последовательностей.

Преимущества молекулярной диагностики:

• универсальность, возможность использовать для анализа любые ДНК-содержащие клетки организма;
• возможность проведения анализа на любой стадии онтогенеза, начиная со стадии зиготы;

Оптимальный срок для пренатальной диагностики молекулярными методами - I триместр беременности, что требует детального ДНК-анализа семьи еще до её наступления.

Материал для анализа

• обследование семей высокого риска и больных в случае генных болезней: муковисцидоз,
  фенилкетонурия, проводят с использованием пятен крови, нанесенных на фильтрованную бумагу, что значительно облегчает транспортировку и хранение образцов из удаленных от диагностических центров районов;
• для некоторых других генных болезней: гемофилия А, миодистрофия Дюшена, диагностика проводится на чистых препаратах ДНК, выделенных из крови плода, клетки которого получают при помощи стандартных инвазивных методов.

Основа ДНК-диагностики - полимеразная цепная реакция синтеза ДНК (ПЦР). Метод позволяет избирательно умножать число (аплифицировать) относительно небольших участков ДНК,

Прямая диагностика основана на непосредственной идентификации мутаций в определенном гене. Достоверность молекулярной диагностики прямым методом очень высока и приближается к абсолютной.

Косвенная (непрямая) диагностика основана на маркировке мутантного гена (больной хромосомы) с помощью молекулярных маркеров. Частота ошибочного диагноза может достигать 2%.

Сочетание ДНК-диагностики с другими методиками:

• в случае гемофилии А возможно прямое определение уровня фактора VIII свертывания крови в пуповинной крови плода после 20 недель беременности;
• при адреногенитальном синдроме - прямое исследование содержания 17-ОН прогестерона в амниотической жидкости;
• диагностика ломкой Х-хромосомы дополняется анализом культуры лимфоцитов пуповинной крови плода;
• в случае муковисцидоза дополнительная информация о состоянии плода может быть получена при биохимическом исследовании активности ферментов АЖ в 17-19 недель беременности.